冲洗： 材料自固定液中取出后，需立即冲洗，使其中所有的固定液全部除去，以妨碍染色 有些固定液，如10%福尔马林液、Bouin氏液固定的材料，若时间较短的话可不必冲洗。但时间过长亦需冲洗 3、脱水（37度恒温箱） 所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来，以利于有机溶剂的渗入，这一过程称为脱水。 脱水是否彻底，直接关系到组织是否能充分透明 脱水过度（原因是组织在纯酒精内时间过久，发生组织质地发生变化）容易造成组织发脆。造成组织发脆的原因还有加温（温度超过36℃）、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡
中二甲苯过多等等。一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关，而忽视了与低浓度的酒精关系，其实低浓度的酒精具有强大的穿透力，比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水，组织如果在低浓度酒精里充分脱水，在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份，因此，仅需短时间就可完成，如果这时不缩短纯酒精的时间，便会引起组织发脆；如果脱水时加温，使用丙酮，还可引起组织收缩，并影响免疫组织化学的标记.
下列的各种切片方法基本上属于制作{yj}玻片的各种切片方法。切片前会因应材料特性要作某些处理，切片后，便进入染色及制片的阶段。
徒手切片:意即仅用双手及刀片来切片的方法。若材料过小，可置于干燥的通草髓中，再徒手切片。
木材切片：木材由于质坚硬，不易进行切片，需要先裁取适当的大小(通常为0.5×0.5×4 厘米，适于切片机的大小)以煮沸法去除材料中的气体，再将材料软化(软化剂如甘油、三甘醇)，软化后的材料再以切片机进行切片。
埋蜡切片：将材料埋于蜡块中，再连同蜡块一同切片，切片完再将材料里的石蜡去除的方法。
肝、脾：由器官背面沿其长轴朝肝门、脾门方向每隔1.5-2cm纵向平行剖开，切成数片，按顺序平放于相应大小的容器中，下面放一层脱脂棉或数层纱布，以便于固定液的渗入。应避免标本弯曲和相互间叠加。
肾：沿肾外缘中线朝肾门做一水平切面，切面向下平放于容器中，再行固定。
肺：由于其组织结构较疏松，放入固定液中常漂浮于液面，故应在其表面覆盖一层脱脂棉或数层纱布，以防止肺组织表面干燥，促进固定液的渗入。如整个肺叶切除，可切开固定，由肺叶外缘中线沿支气管走向朝支气管切缘或肺门方向切开，切面向下，放入固定液中。
