犬用冻精稀释液 狗精子冷冻稀释
应用于犬人工授精,{yx}犬种育种保种工作,犬冷冻精液生产制作;
稀释液的准备:
1.先把犬冻精生产用的A和B液回暖到室温;
2.按体积的20%,加新鲜蛋黄到A液体和B液中(比如4毫升蛋黄到20毫升瓶的A液;2毫升蛋黄到10毫升瓶的B液);
3.手摇把内含液混匀;
4.把A液保存在室温,用于步骤1;
5.把B液瓶冷却到+4°C,用于步骤2;
6.只用富含精子的精液部分来生产冻精。
冲洗:
1.如果收集的精液混有前列腺液,先按1份原精加3-5份A液稀释,然后在700g重力下离心10-15分钟;
2.丢弃上清液;
3.小心缓慢地用A恢复到富含精子的体积(根据以往经验,2-3毫升),混匀(重组精液)。
冷冻操作:
步骤1:*对每份原精(或重组精液),对等缓慢加1份A液,降温到+4°C。
*通常保存在+4°C至少两个小时。
步骤2:*对+4°C保存后的混合精液,用1到3分钟慢慢加B液(也在+4°C),加入B液的量同原始富含精子的体枳相等。
*在+4°C下填充预冷却的细管并封口。
*继续在+4°C保存60分钟。
*把细管放在液氮面上方5厘米处至少20分钟后再整个沉浸到液氮中。
解冻:
1.细管在+38°C解冻1分钟;
2.把解冻的精液合并到一试管中,添加等量事先预温到+38°C精液。
3.立即做子宫内或开腔犬人工授精。