检测循环肿瘤细胞中miRNA的新技术

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越来越多的证据表明，循环肿瘤细胞(CTC)中的micrornA具有诊断和预后的潜力。然而，检测却并非易事。近日，西班牙的研究人员在《Science Reports》上介绍了一种方法，能利用原位杂交检测这种小的非编码RNA。

  CTC是从原发性肿瘤脱落，然后进入循环系统的一种细胞。它们到达其他的组织或器官，导致肿瘤转移。鉴于近年来CTC检测技术的进步，研究人员能够利用这些上皮细胞来监测癌症进展，并跟踪患者对治疗的反应。
  尽管如此，大多数CTC分析的灵敏度较低。据GENYO研究团队介绍，这主要是因为只有少量的上皮标志物可用来鉴定和分离全血中的循环肿瘤细胞，通常是上皮细胞粘附分子(EpCAM)和细胞角蛋白(CK)。然而，这些上皮细胞也可能来自其他上皮组织，而并非肿瘤。
  让事情更加复杂的是，最新数据表明存在一部分CTC，不表达EpCAM或CK。相反，这些细胞表现出上皮-间质转化(EMT)的特征。这个过程与肿瘤转移相关，其中上皮细胞呈现出间质特征，促进迁移、入侵和抗凋亡。
  基于这些原因，探索CTC中miRNA的生物标志物潜力受到了限制。为了解决这个问题，GENYO的研究人员开发出一种称为MishCTC的方法，将原位杂交方法以及基于CK表达的免疫磁性选择和免疫细胞化学相结合，利用锁核酸(LNA)探针来检测miRNA。
  为了验证这种技术，研究人员选择了miR-21，这种miRNA靶定多个肿瘤抑制基因，而且在癌细胞中表达而不在造血细胞中表达，因此是检测CTC的理想标志物。
  他们获得了25例转移性癌症患者的外周血样本，并利用MishCTC方法开展了分析。在这25个样本中，11个样本含有表达CK和miR-21的CTC。对于CK表达丢失的EMT诱导的上皮肿瘤细胞系(MCF-7)，MishCTC技术也成功追踪了miR-21的表达，表明miR-21可能是检测EMT表型的CTC的一个很好的标志物。
  据作者介绍，这些数据第一次证明了原位杂交方法可以用于CTC中miRNA的鉴定。他们目前正在招募大批的癌症患者，以便根据miRNA的表达来研究CTC的异质性。

来自生物帮

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