固定 具有凝固或沉淀组织蛋白的作用,因此能抑制酵解酶类的活动和xj的繁殖,从而呈现对组织的固定作用 (1)10%福尔马林液:1份甲醛液 + 9份蒸馏水市场上出售的甲醛液约含37-40%的甲醛,10%福尔马林液实际上仅含3.7-4.0%的甲醛 适用范围:各种组织。但是经10%福尔马林液固定的组织,细胞核染色较好,而细胞质染色较差 处理:组织块一般固定24h以上,长时间亦可,甚至可用来长期保存组织块。短时间固定的组织块不需水洗,可直接转入70%酒精脱水 (2)Bouin氏液: 苦味酸饱和水溶液(1.22%) 75ml 甲醛液 25ml 冰醋酸 5ml 适用范围:各种动物组织及植物组织的根尖,是动物组织良好的固定液 处理:固定24h,也可在此液长期保存。流水冲洗或不经水洗直接入70%酒精脱水。
组织切片指以生物组织为材料,处理为薄片,应用于玻片以适合显微镜之观察。此为组织学发展的重要工具及方法。常伴随着显微镜技术的发与玻片的制作技术改进而发展。组织切片广泛应用在生物学、医学(病理学、传染病学等)、农学(植物病理学)等领域。
切片的种类
生物学里的切片是指将材料以工具(如刀片、切片机)切成适合以显微镜观察的薄片之手续;或者完成此手续后的标本亦称为切片。
常见的切片种类,依照材料的性质及处理方法有:徒手切片、木材切片、埋蜡切片、透明法、解离法、涂抹法等[1]。若以较严格的定义来看,涂抹法所制成的玻片常被称为抹片,解离法、透明法等制作的玻片标本亦不称为切片。
依照玻片的保存性质可分为临时片及{yj}片;若以使用工具及方式,则有徒手切片或使用切片机.
脱水
①以上各级乙醇脱水时间可根据组织块的大小适当调整。对于小的组织块(如胃黏膜、支气管粘膜等)可适当减少脱水时间,对于较大的组织块可适当增加脱水时间,但各级乙醇最长不要超过12h,无水乙醇不要超过4h。如中途因故不能继续进行下去,则可将标本退回至80%乙醇中保存。另外,脂肪组织和疏松结缔组织一般应延长脱水时间,在95%乙醇中水分必须脱净,脂肪必须溶解掉(50%以上浓度的乙醇可溶解脂肪和类脂质)。否则,石蜡不能渗入脂肪细胞和纤维组织,无法切出好的切片,而且染色时也易脱片。
②若组织含水分过多(如胚胎组织),则脱水剂浓度应由更低级乙醇(如30-40%乙醇)开始,这对保证制片质量十分重要。
③若脱水不尽,切片后蜡块切面组织常出现凹陷(因蜡块中bao埋的组织与空气接触后即干燥收缩)。这样的蜡块,虽能勉强切出切片,但染色效果极差,染色时组织也容易脱落。因此,脱水必须彻底,脱水彻底与否是制片质量好坏的一个重要环节。
④脱水剂的容积应为组织块总体积的5-10倍,脱水剂应及时过滤,更换。